ELISA法是免l疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传l染病、寄生l虫病及非传l染病等方面的免l疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，根据已经使用的结果，认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查，Mouse cGMP kit，而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本，因此，也适合于血l清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗l体，而且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大，
试剂盒组成材料和试剂
1. 羊抗小鼠IgG包被的96孔微孔板一张 catalog No.30101
该微孔板将特异性识别小鼠IgG 的山羊抗l体包被于可拆分酶标条上。
2. cAMP偶联的辣根过氧化物酶工作液6 mL catalog No. 30102
本包装含1000×偶联酶储存液和稀释缓冲液。
3. 抗cAMP的小鼠单克l隆抗l体工作液6 mL catalog No. 26002-2
本包装含1000×抗l体储存液和稀释缓冲液。
注意：为了稳定和长效的实验，抗l体储存于-80℃。在使用前将6μL 1000×偶联酶储存液加入到6 mL 稀释缓冲液中配制为工作液，并轻轻混匀。工作液请避免反复冻融。
4. 中和液6 mL catalog No. 30103
5. 10×浓缩洗涤液15 mL catalog No. 30103
含去污剂的磷酸盐缓冲液。
6. cAMP标准品0.25 mL catalog No. 30203
浓度5000 pmol/ mL
7. 显色底物A，12 mL catalog No. 30107
8. 显色底物B， 12 mL。 catalog No. 30108
9. 终止液，6 mL； catalog No. 30110
注意：该溶液有腐蚀性；储存时请旋紧瓶盖
结果计算
样品中cAMP浓度有多种计算方法。X轴表示cAMP标准品浓度，Y轴表示净光密度的平均值或者百分比值。
1 样品和标准品的净光密度(OD)平均值的计算：
净OD平均值 = OD平均值 － NSB孔OD平均值
2 计算不同梯度浓度标准品的结合率占较大结合率(B0孔)的百分比，计算公式 如下：
百分比值 = (净OD平均值/ B0孔OD平均值)×100
3 绘制净OD平均值或百分比值对cAMP标准品浓度的Logit-Log曲线。通过插值即可得到样品中cAMP浓度。
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