ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应。以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原，CAMP/CGMP 代检测服务，而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体，而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。
影响Elisa试验结果的因素很多，故加强各个环节的质量的保证才能充分发挥其方法学的优点。
不管是哪一种ELISA，它的操作都由以下几种基本的操作组合而成：①将抗原或抗体吸附到固相载体上；②加入待检样品以及后续试剂；③温育；④洗涤去掉游离未结合的反应物；⑤加入酶检测底物；⑥结果的判读。
ELISA操作步骤复杂，影响反应因素较多。
测定小分子量物质常用竞争法，其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。
ELISA（酶联免疫吸附剂测定）一般指酶联免疫吸附剂测定酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay，简写ELISA或ELASA）指将可溶性的抗原或抗体结合到polystyrene等固相载体上，利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。酶联免疫吸附测定（ELISA）为免疫学中的经典实验，本词条从定义、基本原理、分类方法、操作要点等方面对其进行了详细介绍。
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